简介
硅藻分布广泛,除江、河、湖、海等自然水体外,自来水、湿润的土壤、空气及某些食物中均可能存在硅藻,因此硅藻检验过程中应做好污染防范。
对于检材提取,近年来国内外均提出了详细的规定,
例如,解剖、取材必须严格按规定顺序进行,所使用的器械、试剂、耗材均应不含硅藻,尽量使用一次性耗材等[1-3]。
目前,国内常规的取材器官为肺、肝、肾;对于腐败尸体,骨髓及牙髓被认为是最可靠的检材[1]。
实践中,有些解剖室设施不符合要求,无防污染设备,自来水不经处理直接接触尸体或器官,缺乏一次性取材工具;
有些法医防污染意识不强、取材不规范,这些因素导致污染时有发生。
实验结果对比
未做防污染措施
同一案件(股骨骨髓中检出硅藻)
已做防污染措施
同一案件(股骨骨髓中未检出硅藻)
未采取防污染措施
股骨骨髓中检出的硅藻
骨髓中检出硅藻的尺寸
长径59.93μm,
短径20.81μm
小结:原案件检测结果为阴性,对比实验-未做防污染措施,检材中检出较多硅藻,结果误判为阳性。
防污染工具
1
硅藻提取包
硅藻提取包
铺巾
手套
塑料试管
密封袋
镊子
手术刀
注释:一次性使用,防止交叉污染。
2
仪器设备
水质不低于 GB/T 6682—2008 规定的二级水。
-用于前处理所有步骤,每个步骤都不用自来水。
纯水仪
01
通风橱
02
通风橱应以耐酸、耐碱材料建造。
-保护人员防止有毒气体危害的一级屏障。
3
取材
参照法庭科学 硅藻检验技术规范 微波消解-真空抽滤-显微镜法(GA/T 1662-2019)。
脏器组织取材过程
1
肝:切除肝脏表面组织,切取约10g深部组织。
2
肾:沿肾外缘纵向切开剥离包膜,切取约10g深部组织。
3
肺:切除肺表面组织,切取约2g组织。
纯水清洗检材
切取
切除器官表面组织
切取深部组织
称量深部组织
注释:均在通风橱内操作。
骨髓取材过程
1
刮净骨骼上的软组织和骨膜;
2
用纯水冲洗骨骼3次;
3
锯开骨干,用手术刀去除与锯片接的骨髓组织;
4
用刮匙刮取全部骨髓组织,置塑料盒(或塑料袋、塑料试管)中;
5
取约10g骨髓组织,参见附录C中每个消解罐中骨髓组织量,将其均分为若干份,分别置于塑料试管中;
6
剩余组织置于原包装物中冷冻保存。
取材—因表层组织可能在解剖、运输过程中被污染,故只取器官的深部组织。
防污染的意义
近年来硅藻检验方法的灵敏度显著提高,溺死尸体硅藻阳性率已从约30%提高至95%以上,然而“假阳性”的风险也随之增大,检验中可能导致假阳性结果的因素包括解剖室和实验室中的自来水、工具器械、取材和前处理步骤等。
文献[4]报道了一个“假阳性”案例,总结产生污染的原因为就地解剖取材、重复使用器械。因此,硅藻检验实践中污染防范至关重要,需高度重视。
参考文献
[1] 赵子琴.法医病理学[M].北京:人民卫生出版社, 2012:316-328.
[2] Hurlimann J,Feer P,Elber F, et al. Diatom detection in the diagnosis of death by drowning[J].International Journal of Legal Medicine,2000,114(1-2):6-14.
[3] 中华人民共和国公安部.硅藻检验技术规范 微波消解-真空抽滤-显微镜法:GA/T 1662-2019[S].北京:中国标准出版社,2019.
[4] 赵建,马雁兵,石河,等.水中尸体硅藻检验污染1例[J].法医学杂志,2017,35(5):554-555.