研究背景简介
在探索极低强度超声波 (VLIUS) 如何作用于小鼠大脑类淋巴系统的研究工作中，科研人员需要对大脑样本进行细致处理。他们通过制作脑组织切片来观察脑脊液示踪剂的分布路径，并结合免疫荧光染色技术，以准确评估 VLIUS 的干预效果及其内在的作用机制。
使用的仪器
这项研究选用了DTK–1000N 型振动切片机来完成组织切片工作。
具体操作流程
研究人员操作 DTK–1000N 切片机处理预先固定好的小鼠大脑样本。为了追踪脑脊液示踪剂的去向，他们将大脑切成 500µm 厚的冠状切片。这些切片经过透明化处理后，就可以在荧光显微镜下观察示踪剂进入血管周围间隙的细节，比如进入的数量、深度以及覆盖范围。
另外，要深入了解 VLIUS 的作用机理，就需要进行免疫荧光染色，观察像 TRPV4、AQP4 这些关键蛋白的表达和位置，或者通过 GFAP 染色来判断是否有神经炎症反应。针对这一需求，研究人员同样借助 DTK–1000N，将固定的大脑切成 250µm 厚度的冠状切片。这个厚度非常适合进行游离漂浮法染色，能让抗体更好地渗入组织内部与目标蛋白结合，便于后续使用共聚焦显微镜等设备，清晰地观察蛋白表达的模式和细胞的形态特征。
下面的图片展示了利用 DTK–1000N 切片后，经过一系列处理和成像得到的脑组织切片效果：
图 1A: 这张图显示的是 500µm 厚的冠状脑切片，直观对比了对照组与 VLIUS 处理组中脑脊液示踪剂（红色荧光部分）的渗透情况。
图 4C: 这同样是 500µm 厚的切片，它展示了在不同药物处理条件下，示踪剂在大脑中的分布有何不同。
补充图 S4: 这组图包含了一些经过不同组织学染色和免疫荧光染色的脑切片（其中部分是 250µm 厚），主要用于评估 VLIUS 操作的安全性。
DTK–1000N 振动切片机在这项研究里是完成组织学处理的关键工具。它被用来精确制备 500µm 和 250µm 两种厚度的小鼠大脑切片，这些切片为后续的荧光示踪剂分析和免疫荧光染色工作提供了必需的样本材料，从而支撑了对 VLIUS 如何影响类淋巴系统及其背后机制的深入探究。可以说，DTK–1000N在组织切片环节的可靠应用，是整个实验分析得以顺利进行的重要保障。
参考文献
本文内容主要参考自以下研究：
Liao, W. H., Wu, C. H., Chu, Y. C., Hsiao, M. Y., Kung, Y., Wang, J. L., & Chen, W. S. (2023). Enhancing glymphatic function with very low–intensity ultrasound via the transient receptor potential vanilloid–4–aquaporin–4 pathway. bioRxiv, 2023.01.13.523878. doi: 10.1101/2023.01.13.523878
